UMI-77 (UMI77, UMI 77)
UMI-77 adalah inhibitor Mcl-1 selektif. UMI-77 berikatan dengan alur pengikat BH3 dari Mcl-1 dengan Ki 490 nM dan selektif terhadap anggota keluarga Bcl-2 lainnya.
Bioaktivitas
Target & IC50
- MCL1: 490 nM (Ki)
- Bcl-W: 8.19 μM (Ki)
- Bfl-1: 5.33 μM (Ki)
- Bcl-xL: 32.99 μM (Ki)
- Bcl-2: 23.83 μM (Ki)
In Vitro
Metode: Lima sel PC (MiaPaCa-2, AsPC-1, Panc-1, BxPC-3, Capan-2) dengan ekspresi protein anti-apoptosis dan pro-apoptosis berbeda diobati dengan UMI-77 (1, 10, 100 μM) dan efek sitotoksik dievaluasi.
Hasil: Nilai IC50 UMI-77 terhadap sel BxPC-3, Panc-1, MiaPaCa-2, AsPC-1, dan Capan-2 masing-masing adalah 3,4; 4,4; 12,5; 16,1; dan 5,5 μM.
In Vivo
Metode: UMI-77 (60, 80 mg/kg, injeksi intravena) digunakan untuk mengamati pertumbuhan tumor pada model xenograft BxPC-3 mencit SCID dan dilakukan analisis Western blot dan imunohistokimia pada jaringan tumor.
Hasil: Pengobatan dengan UMI-77 setiap hari selama 5 hari berturut-turut per minggu selama dua minggu menghambat pertumbuhan tumor sebesar 65% dan 56% pada hari ke-19 dan ke-22; Western blot lisat jaringan tumor menunjukkan peningkatan sedikit protein pro-apoptosis Bax dan Bak serta penurunan signifikan survivin.
Uji Kinase
Uji pengikatan berbasis polarisasi fluoresensi: Berdasarkan nilai Kd, konsentrasi protein yang digunakan dalam eksperimen pengikatan kompetitif adalah 90 nM untuk Mcl-1, 40 nM untuk Bcl-w, 50 nM untuk Bcl-xL, 60 nM untuk Bcl-2, dan 4 nM untuk A1/Bfl-1. Proba fluoresen Flu-BID dan FAM-BID ditetapkan pada 2 nM untuk semua pengujian kecuali A1/Bfl-1 yang menggunakan FAM-BID pada 1 nM. 5 μL senyawa uji dalam DMSO dan 120 μL kompleks protein/proba dalam buffer uji (100 mM kalium fosfat, pH 7,5; 100 μg/ml gamma globulin sapi; 0,02% natrium azida) ditambahkan ke pelat uji (Microfluor 2 Black), diinkubasi pada suhu kamar selama 3 jam, dan nilai polarisasi (mP) diukur pada panjang gelombang eksitasi 485 nm dan emisi 530 nm menggunakan pembaca pelat Synergy H1 Hybrid. Nilai IC50 ditentukan dengan fitting regresi non-linear dari kurva kompetisi.
Penelitian Sel
Sel kanker pankreas manusia AsPC-1, BxPC-3, dan Capan-2 dikultur dalam medium RPMI-1640, sedangkan Panc-1 dan MiaPaCa dikultur dalam DMEM, semuanya dengan 10% FBS. Penghambatan pertumbuhan sel setelah perlakuan dengan konsentrasi senyawa yang meningkat ditentukan dengan uji WST-8. (Hanya untuk Referensi)
Sifat Kimia
- Berat Molekul: 468.34
- Rumus: C18H14BrNO5S2
- No. CAS: 518303-20-3
- Smiles: OC(=O)CSc1cc(NS(=O)(=O)c2ccc(Br)cc2)c2ccccc2c1O
- Densitas Relatif: 1.79 g/cm3 (Prediksi)
Penyimpanan & Informasi Kelarutan
Penyimpanan: Serbuk -20°C selama 3 tahun | Dalam pelarut: -80°C selama 1 tahun. Pengiriman dengan es biru / suhu ruang. Suhu penyimpanan aktual harus mengacu pada COA.
Kelarutan: DMSO: 83.33 mg/mL (177.93 mM), sonikasi dianjurkan. H2O: < 1 mg/mL (tidak larut atau sedikit larut). Etanol: 86 mg/mL (183.63 mM), sonikasi dianjurkan.
Formulasi In Vivo: 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween 80 + 45% Saline: 8.6 mg/mL (18.36 mM), Larutan.
Catatan: Harap tambahkan pelarut secara berurutan, memperjelas larutan sebanyak mungkin sebelum menambahkan pelarut berikutnya. Larutkan dengan pemanasan dan/atau sonikasi jika perlu. Larutan kerja dianjurkan untuk disiapkan dan digunakan segera. Formulasi di atas hanya sebagai referensi. Formulasi in vivo dapat bervariasi dan harus dimodifikasi berdasarkan kondisi eksperimental spesifik.
Tabel Persiapan Larutan
| Konsentrasi | 1 mg | 5 mg | 10 mg | 50 mg |
|---|---|---|---|---|
| 1 mM | 2.1352 mL | 10.6760 mL | 21.3520 mL | 106.7600 mL |
| 5 mM | 0.4270 mL | 2.1352 mL | 4.2704 mL | 21.3520 mL |
| 10 mM | 0.2135 mL | 1.0676 mL | 2.1352 mL | 10.6760 mL |
| 20 mM | 0.1068 mL | 0.5338 mL | 1.0676 mL | 5.3380 mL |
| 50 mM | 0.0427 mL | 0.2135 mL | 0.4270 mL | 2.1352 mL |
| 100 mM | 0.0214 mL | 0.1068 mL | 0.2135 mL | 1.0676 mL |
Catatan: Tabel pengenceran hanya berlaku untuk produk padat. Untuk produk cair, harap hitung larutan stok berdasarkan konsentrasi dan/atau kepadatan yang dinyatakan.
Kalkulator
Kalkulator Molaritas, Kalkulator Pengenceran, Kalkulator Rekonstitusi, Kalkulator Berat Molekul.
Kalkulator Formulasi In Vivo (Larutan Jernih)
Masukkan informasi percobaan hewan Anda dan klik Hitung untuk mendapatkan metode preparasi larutan stok dan formulasi in vivo. Contoh: Dosis 10 mg/kg untuk hewan 20 g, volume dosis 100 μL per hewan, total 10 hewan, formulasi 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween 80 + 45% Saline/PBS/ddH2O, konsentrasi larutan kerja 2 mg/mL.
Preparasi Larutan Stok: Larutkan 2 mg senyawa dalam 100 μL DMSO untuk mendapatkan larutan stok 20 mg/mL. Jika konsentrasi melebihi kelarutan, hubungi dukungan teknis.
Preparasi Formulasi In Vivo: 1) Tambahkan 100 μL larutan stok DMSO ke 400 μL PEG300, campur hingga jernih. 2) Tambahkan 50 μL Tween 80, aduk rata. 3) Tambahkan 450 μL Saline/PBS/ddH2O, campur hingga homogen.
Contoh ini hanya untuk demonstrasi dan bukan rekomendasi formulasi. Pilih strategi pelarutan yang sesuai berdasarkan model eksperimental dan rute pemberian.
